informe N°1

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FALCULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA  DE LABORATORIO CLÍNICO E HISTOPATOLÓGICO

CATEDRA DE:

TECNICAS HISTOLOGÍCAS – PRÁCTICA

INFORME: N°-1

AUTORA: JOSSELINE AREQUIPA REATIQUI

DOCENTE:

LIC. IVAN PEÑAFIEL

TEMA:

RECONOCIMIENTO DEL ÁREA DE ANATOMÍA PATOLOGÍCA Y CLASIFICACIÓN DE DESECHOS

GRUPO: N°1

CUARTO SEMESTRE

PERIODO ACADÉMICO: OCTUBRE 2015- FEBRERO 2016

RIOBAMBA – ECUADOR

1.     INTRODUCCIÓN

En un laboratorio de Anatomía Patológica, se realiza el procesamiento de tejidos, biopsias, entre otros.  Con la ayuda de estos exámenes se puede brindar  un  diagnóstico, oportuno y preciso, es muy importante saber cómo una persona debe manejarse dentro del laboratorio de anatomía patológica y tener ciertos cuidados los cuales garantizan un buen desarrollo y trabajo de calidad y calidez. También es importante conocer la clasificación de los diversos desechos producidos en el área de trabajo.

OBJETIVOS.

1.1.                      Objetivo General.

Identificar el área de anatomía patológica.

1.2.                      Objetivos Específicos.

·         Realizar reconocimiento del área total requerida y distribución para un laboratorio de anatomía patológica.

·         Observar los equipos  y materiales necesarios en cada área de trabajo en un laboratorio de anatomía patológica.

·         Clasificar cada uno de los desechos generados dentro del área de anatomía patológica.

2.     FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA

2.1.                      FIJACION

En este paso el tejido obtenido se coloca en una sustancia fijadora para evitar los cambios post-mortem y para lograr conservar, la forma original del tejido. Unos de los fijadores más usado es el formol al 10% (formaldehido).

·         Casi siempre es más difícil seccionar las muestras mal fijadas que aquellas  que están bien fijadas.

·         Los tejidos mal fijados siempre mostraran menos características morfológicas aunque se hayan procesado de manera óptima y con cuidado.

PROCESAMIENTO DE TEJIDOS

Un bloque de parafina será difícil de seccionar, a no ser que una muestra bien fijada sea procesada de manera adecuada utilizando un programa apropiado.

·         Las muestras pueden estar poco procesadas o demasiadas procesadas. En ambos casos, pueden ser difícil o imposible realizar un corte.

·         Existen varias técnicas que se puedes utilizar para obtener secciones de bloques difíciles.

·         Si es complicado seccionar el bloque porque el tejido es duro, la superficie expuesta puede empaparse en agua fría o en un agente reblandecedor, como una solución de detergente blando suavizante.

INCLUSIÓN DE TEJIDOS

Realice la inclusión de las muestras con cuidado.

La inclusión es un paso importante que precisa una aproximación cuidadosa. Una inclusión poco cuidadosa puede hacerse en microtomía mucho más difícil.

·         No llenar lo suficiente el molde de inclusión puede dar lugar a una sujeción inestable en el micrótomo y originar cortes de distinto espesor.

·         Evitar llenar excesivamente los moldes de inclusión porque esto puede interferir con la alineación correcta de la cara del bloque durante el corte.

MICROTOMÍA

La posición del micrótomo en el laboratorio es importante.

·         Coloque el micrótomo en un lugar estable, lejos de ráfagas de aire, puertas y puntos de paso. Cualquier movimiento del aire debido a los equipos de aire acondicionado u otras causas puede hacer que el tratamiento de la sección sea muy difícil.

·         Es preferible utilizar un banco ajustable en la altura de una silla ergonómica.

·         Es muy importante que el personal no sea distraído al usar el micrótomo por los riesgos de lesionarse con los cuchillos.

·         Es preferible tener un suelo antideslizante en las inmediaciones de los micrótomos

ESTUDIE LAS CARACTERÍSTICAS DEL DISEÑO DE SU MICRÓTOMO Y APRENDA A USARLAS 

Los micrótomos con retracción están diseñados para que la muestra se retire de la cuchilla en la carrera ascendente. Es importante saber si su micrótomo tiene esta presentación.

·         La posición retraída es una característica de diseño que proporciona distintas ventajas durante el corte.

·         Al usar el micrótomo de retracción, el alineamiento de la cara del bloque al borde de la cuchilla debe ser efectuado con el bloque en la carrera descendente.

·         Los micrótomos también pueden ser manuales, semimotorizados o completamente motorizados.

FIJACIÓN

Los fijadores físicos se basan o bien en una congelación muy rápida del tejido o bien en la aplicación de calor elevado. Se utilizan cuando los fijadores químicos alteran la estructura que queremos observar, cuando necesitamos una fijación muy rápida, o cuando el tipo de tejió y la técnica que usaremos lo requiera. La congelación rápida es un buen método de preservación de las características moleculares y es conveniente que sea rápida puesto que así se impide la formación de grandes cristales de hielo que nos destrozarían la estructura del tejido.

Inmersión. En el método de inmersión las piezas de tejido se sumergen en la solución fijadora. Hay que tener en cuenta algunas precauciones:

1)      Las piezas de tejido no deberían superar los 0.5 cm de espesor para que el fijador alcance el interior de la pieza antes de que ésta comience a deteriorarse. Esto depende de la velocidad de penetración del fijador y de las características del tejido. Por ejemplo, si tiene cavidades por donde penetre la solución fijadora el volumen podría ser mayor.

2)      El volumen recomendado de fijador es 20 veces superior al volumen de la pieza.

3)      La osmolaridad del tejido y de la solución fijadora deben estar equilibradas.

4)      El pH del fijador debe ser próximo al fisiológico.

5)      El tiempo de fijación depende de cada tipo de fijador. Una agitación suave durante la fijación ayuda a la penetración del fijador y disminuye el tiempo.

Consiste en interrumpir los procesos de degradación (autolisis y putrefacción) que aparece tras la muerte celular, tratando de conservar la arquitectura y composición tisular lo más próxima posible a como se encontraba en el organismo vivo. El reactivo más utilizado para fijar tejidos es el Formol en una dilución al10%.

Descripción macroscópica y tallada de la muestra:

Por medio de este procedimiento se da una descripción general del tejido a procesar, mencionándose: dimensiones, color, consistencia, presencia de alteraciones, etc; se realizan diversos cortes dependiendo del tipo de muestra para anotar el estado en q se encuentra la muestra, con el fin de identificar anomalías morfológicas.

Lavados

Se debe lavar el tejido para quitar el exceso de fijador.

2.2.                      DESHIDRATACION

Procesos que requieren un procesador de tejidos

Tiempo óptimo para este paso: 12 horas.

El exceso de fijador al momento de la infiltración, incluso en la microtomía, podría afectar los cortes histológicos, y por ello se debe lavar. La deshidratación se hace empleando diferentes soluciones de alcohol de concentración creciente. (Procesamieno histologico, 2013)

2.3. ACLARAMIENTO

En este paso se sustituye el alcohol por un disolvente de parafina. El más usado es el xilol (xileno) ya que como la muestra está deshidratada, el xilol entrará hasta lo más profundo del tejido. También el tejido pierde color y adquiere un tono acaramelado. (Procesamieno histologico, 2013).

2.4. INFILTRACION

En este paso la muestra se coloca en parafina líquida, cabe mencionar que se debe usar parafina histológica. Como se ha dicho en el paso anterior el tejido está completamente lleno de xilol, ahora debido a ósmosis sale el xilol y entra la parafina.

La deshidratación, aclaramiento e infiltración pueden ser realizadas manualmente pero hoy en día se realizan de modo automático en máquinas específicas.

2.5. INCLUSIÓN

Tiene como finalidad proporcionarle al tejido un soporte solido que posibilite realizar cotes muy finos, por lo que es de suma importancia que el medio utilizado para la inclusión penetre al interior del tejido. Aquí se forman bloques de parafina dentro de los cuales están las muestras a estudiar. También hay máquinas especializadas para la inclusión en parafina de tejidos. Después de su inclusión y posterior secado, estos se deben poner a enfriar en un congelador para su posterior corte. Puede llevarse a cabo en Parafina (Procesamieno histologico, 2013)

2.6. MICROTOMÍA

·         Tenga cuidado al efectuar un “recorte”, un “refrentado” o un “desbastado”.

·         En la microtomía, esta etapa requiere un excelente cuidado, ya que tejido importante para el diagnóstico se puede perder fácilmente o la superficie del bloque puede ser dañada.

·         El objetivo de recortar un bloque de forma adecuada es exponer el tejido con cautela en el nivel en el que se pueda obtener una sección representativa.

·         El recorte normalmente se efectúa con unos grosores de entre 10 y 30 μm.

·         Asegúrese de que los bloques están fríos

·         El corte normalmente mejora cuando la muestra está bien incluida en parafina dura.

·         Por esta razón, la mayoría de los bloques de parafina deben estar fríos cuando se cortan las secciones. El método exacto utilizado para enfriar el bloque es importante.

·         La parafina fría proporciona un mejor soporte para los elementos duros en una muestra, permitiendo que se obtengan secciones más delgadas (Microsystems, 2008).

2.7. BAÑO DE FLOTACIÓN

·         La flotación debería expandir la sección a sus dimensiones originales y garantizar que es completamente plana.

·         Supervise la temperatura con cuidado. La temperatura deberá oscilar entre 5-9 ̊C por debajo del punto de fusión de la parafina.

·         Asegúrese de que el agua está limpia y de que no tenga burbujas ni residuos de la sección (para evitar una contaminación entre sí).

·         Coloque las secciones con el lado liso (brillante) hacia abajo.

·         Coloque las secciones en la superficie del agua con un movimiento de barrido suave.

·         Las secciones se pueden dañar con mucha facilidad al quitar las arrugas o burbujas con un cepillo o pinzas.

·         Examine cada sección mientras flota en la superficie del agua, ya que las imperfecciones se pueden ver fácilmente.

·         Deje la muestra seccionada en la superficie del agua el tiempo suficiente para que se alise. Una expansión excesiva puede estropear la morfología en secciones sensibles.

·         Para propiciar un drenaje eficiente y para prevenir que la sección se caiga del portaobjetos, extraiga los portaobjetos del agua en posición vertical.

·         Las secciones de dos bloques diferentes no deben flotar en el agua simultáneamente.

·         Incluso aunque las muestras sean de un tipo diferente, existe la posibilidad de una contaminación entre sí y de confusión, lo que provocaría una identificación incorrecta. Por eso, este procedimiento debería evitarse en todas las ocasiones (Microsystems, 2008).

2.8. ESTUFA DE DESPARAFINACIÓN

Después de extender y montar el corte en una laminilla el corte debe ser secado para evitar su desprendimiento y desparafinar los cortes, la desparafinación se lleva acabo introduciendo las laminillas acomodadas en una canastilla de portaobjetos, a la estufa a una temperatura de 60ºC por 30 minutos (Histología, 2005).

2.9.TINCIÓN

Una de las tinciones más comúnmente usada en histología es la hematoxilina-eosina sobre cortes de parafina. Como vemos se usa un colorante básico y otro ácido para teñir de diferente color a las estructuras ácidas y básicas de la célula. Antes de proceder a la tinción, si partimos de cortes de parafina, tenemos que llevar a cabo unos tratamientos previos sobre las secciones como es el desaparafinado, y la hidratación puesto que estos colorantes son hidrosolubles. Si partimos de cortes de criostato esto no se lleva a cabo (Ross, 2005).

2.10.                   MONTAJE

Una vez teñido, se deshidrata de nuevo, de tal manera que pueda fijarse de modo permanente el cubreobjetos con un medio adecuado para el montaje (por ejemplo una gota de Bálsamo de Canadá o similar). Los medios de montaje pueden ser miscibles o no miscibles en agua, si son miscibles en agua ya no es necesaria la deshidratación después del teñido, se puede montarlo directamente. El cubreobjetos no solo protege el tejido, sino que se requiere para observar el corte con un microscopio (Hammersen).

2.11.                   DIAGNÓSTICO

Todo este proceso sirve para diagnosticar diferentes patologías en los distintos órganos y tejidos observados.

3.     MATERIALES Y MÉTODOS

3.1.                      RECONOCIMIENTO DEL ÁREA TOTAL REQUERIDA Y DISTRIBUCIÓN PARA UN LABORATORIO DE ANATOMÍA PATOLÓGICA

Para poder realizar un buen trabajo se debe conocer muy bien las áreas que se pueden encontrar en un laboratorio Anatomía Patológica y sobre todo la  distribución de cada departamento o lugar que ocupa un equipo,  ya que esto depende de las condiciones en que se pueda encontrar el laboratorio y los recursos económicos del mismo. Se pudo reconocer la distribución de los equipos de laboratorio ya que estos deben estar en la misma secuencia para poder tener una descripción macroscópica muy buena y unos excelentes resultados al momento de encontrar anomalías y poder dar un diagnóstico exacto.

3.2.                     OBSERVACIÓN DE LOS EQUIPOS Y MATERIALES NECESARIOS EN CADA ÁREA DE TRABAJO EN UN LABORATORIO DE ANATOMÍA PATOLÓGICA.

Para la manipulación de los diferentes equipos existentes un laboratorio de anatomía patológica se debe conocer el funcionamiento de cado uno y para qué sirven a continuación los materiales reconocidos en el laboratorio.

3.2.1.   Macroscopía

Es importante saber reconocer a un órganos a simple vista para saber de qué es lo que trata y que debemos hacer, las características que posee es una plancha con un ángulo por el cual se desliza el agua al momento de realizar cortes, tiene un material de madera de corcho, se debe cambiar la plancha ya que puede existir suturas y esta dañaría a momento de cortar las muestras.

Plancha tipo triangulo

3.2.2.   Equipo o estación de inclusión de tejidos en parafina

Con la ayuda del presente equipo se realizan bloques de  parafina, se debe tener en cuenta que debe prenderse seis horas antes del inicio de la práctica. Está constituido por celdas calientes, celdas frías, un reservorio para la parafina que se encuentra fría y solidificada, tiene una luz led.

Las casetas que vienen del procesamiento de tejidos se deposita en una celda caliente y en la otra celda van estar los moldes para poder confeccionar, el tejido que se encuentra en la caseta sale y al estar en contacto con la parafina toma una consistencia solidificado para después pasar a la plancha de fría.

Inclusión de tejidos en parafina

3.2.3.   Plancha fría - 5° centígrados

Es una plancha en friz o plancha fría no debe sobrepasar los -5 grados centígrados con la plancha fría se puede moldar y desmoldar la parafina. 

Plancha fría

3.2.4.      Micrótomo

Es un equipo manual que  ayuda a realizar cortes en micras, tiene partes móviles e inmóviles, debe estar en un lugar estable, consta de dos manivelas; una de ellas nos ayuda  adelantar al momento de realizar los corte y con la otra realizamos cortes arriba, abajo y desgaste  y el corte definitivo tiene que ser en forma circular con la misma manivela, el porta cuchillas es móvil y muy liviano se debe tener cuidado. Después de ser utilizado siempre se debe dejar puesto el seguro ya que pueden causar accidentes.   

Micrótomo

 

3.2.5.      Baño de flotación

Al realizar los cortes salen en cintas e ingresan en el baño de flotación en donde se realiza la pesca con el portaobjetos.

3.2.6.      Estufa de histopatología

Nos ayuda a la desparafinizacion esto quiere decir libera toda partícula que contenga parafina.

3.2.7.      Batería de tinción

Lugar donde se realizara la tinción con alcohol, hematoxilina eosina.

3.3.                     CLASIFICACIÓN DE LOS DESECHOS GENERALES DENTRO DEL ÁREA DE ANATOMÍA PATOLÓGICA.

Para poder eliminar el material contaminado se debe utilizar recipientes o bolsas plásticas  para diferenciar el material contaminado de esta manera poder depositar y eliminar sin riego alguno.

 CLASIFICACIÓN

3.3.1.      Desechos Comunes: No representan peligro para la salud y sus características son similares a las que presentan los desechos comunes (Papeles, cartones, caja, entre otros).

3.3.2.      Desechos Corto punzantes: Agujas hipodérmicas, jeringuillas, agujas, bisturís, placas de cultivo, cristalería entera o rota, etc. Se consideran cualquier corto punzante desechado, aun cuando no haya sido usado son aquellos que nos pueden causar algún tipo de punción o corte.

3.3.3.      Desechos Infecciosos: Son aquellos que pueden transmitir enfermed Son los generados durante el diagnostico, tratamiento, etc. Desechos Infecciosos o biológicos materiales provenientes de Salas de Aislamiento de Pacientes: Desechos biológicos, excreciones, exudados, papeles, Etc. Materiales Biológicos: Cultivos, muestras, medios de cultivo, placas de petri, instrumental, vacunas vencidas, filtros de áreas altamente contaminadas.

3.3.4.      Desechos  Especiales: Son aquellos generados durante las actividades auxiliares de los centros de  atencion de salud que no han entrado en contacto con los pacientes. Ni con los agentes infecciosos. Constituyen un peligro para la salud por sus características agresivas tales como: Corrosividad Reactividad Inflamabilidad Toxicidad Explosividad Y radiactividad Desechos especiales Desechos químicos peligrosos Desechos farmacéuticos Desechos radiactivos.

4.     CONCLUSIONES

·         El área de anatomía patológica debe ser muy bien distribuida, y organizada de esta forma es importante manejarnos organizadamente y cumplir con todas las normas de bioseguridad para resguardar la integridad de todos los estudiantes.

·         El uso y manejo de los diferentes equipos deben ser realizados correctamente para así garantizar un resultado de calidad.

·           Clasificar los desechos es primordial dentro del área del laboratorio, hay que tener mucho cuidado donde se coloca todos y cada uno de los desechos ya que esto puede ser un muy peligroso para e personal.

5.      BIBLIOGRAFÍA

Hammersen, S. (s.f.). HISTOLOGIA, ATLAS EN COLOR DE ANATOMIA MICROSCOPICA. . Editorial Salvat. 3ª Edición. México. 1988, pp. 1-5.

Histología. (2005). Histología: Métodos e instrumentos de estudio de la Histología. Parte I: Técnica histológica, Guía de actividad Nº1.

Microsystems, L. (2008). Instruction Manual Leica RM2235 V1.3 Nussloch:Leica Microsystems.

Procesamieno histologico. (mayo de 2013). Obtenido de Scrib: http://es.wikipedia.org/wiki/T%C3%A9cnica_histol%C3%B3gica

PROCESO DE TEJIDOS HISTOLOGICOS. (18 de FEBRERO de 2014). Obtenido de WIKIPEDIA: http://es.wikipedia.org/wiki/T%C3%A9cnica_histol%C3%B3gica

Ross, M. K. (2005). Histología. Texto y atlas color con biología celular y molecular. . Editorial Médica Panamericana. Madrid.